商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-32a(+)-NSP6質粒
英文名稱
pET-32a(+)-NSP6 plasmid
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1272
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方(fang)法
1.溶解: 收到(dao)質(zhi)(zhi)粒干粉后(hou)(hou),請加(jia)入(ru) 20μl 無菌水至管底,溶解質(zhi)(zhi)粒,室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)(hun)合(吸附(fu)質(zhi)(zhi)粒): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)(zhi)粒 DNA 5~10µl 混(hun)(hun)勻,冰(bing)上(shang)放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導入(ru): 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修(xiu)復培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang): 毎管加(jia) 800µl LB 液(ye)體(ti)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang): 將適(shi)當(dang)體(ti)積(100 µl)的復蘇(su)細胞,涂(tu)布(bu)在(zai)相應抗性的 LB 平板(ban)上(shang),正置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂(zhi)面(mian)務必干燥后(hou)(hou)), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌落(luo)(luo)。 7.提取: 挑取單(dan)克(ke)隆(long)菌落(luo)(luo)至相應抗性 LB 液(ye)體(ti)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據(ju)試驗需要(yao)提取質(zhi)(zhi)粒。
生長條件
LB+氨芐青霉素,37℃,克隆菌株BL21(DE3)
存(cun)儲條件
2-8℃
安全(quan)等(deng)級
1
應用領域
質粒載體
共享(xiang)方式
公益(yi)性共享
