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pET-32a(+)-NSP6質粒





pET-32a(+)-NSP6質粒

  • 商品貨號:BJ-J1272
    商品庫存: 100
  • 商品品牌:邦景/BHBT
  • 上架時間:2023-07-10
    商品點擊數:207

商品描述:

商品屬性

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產品名稱

pET-32a(+)-NSP6質粒

 英文名稱

pET-32a(+)-NSP6 plasmid

 規格

 質粒干粉

 貨號

BJ-J1272


商品詳情

培(pei)養基

酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)

傳(chuan)代方(fang)法

1.溶解: 收到(dao)質(zhi)(zhi)粒干粉后(hou)(hou),請加(jia)入(ru) 20μl 無菌水至管底,溶解質(zhi)(zhi)粒,室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)(hun)合(吸附(fu)質(zhi)(zhi)粒): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)(zhi)粒 DNA 5~10µl 混(hun)(hun)勻,冰(bing)上(shang)放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導入(ru): 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修(xiu)復培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang): 毎管加(jia) 800µl LB 液(ye)體(ti)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang): 將適(shi)當(dang)體(ti)積(100 µl)的復蘇(su)細胞,涂(tu)布(bu)在(zai)相應抗性的 LB 平板(ban)上(shang),正置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂(zhi)面(mian)務必干燥后(hou)(hou)), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌落(luo)(luo)。 7.提取: 挑取單(dan)克(ke)隆(long)菌落(luo)(luo)至相應抗性 LB 液(ye)體(ti)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據(ju)試驗需要(yao)提取質(zhi)(zhi)粒。

生長條件

LB+氨芐青霉素,37℃,克隆菌株BL21(DE3)

存(cun)儲條件

2-8℃

安全(quan)等(deng)級

1

應用領域

質粒載體

共享(xiang)方式

公益(yi)性共享

 

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