商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-32a(+)-NSP7質粒
英文名稱
pET-32a(+)-NSP7 plasmid
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1273
商品詳情
培養(yang)基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代(dai)方法
1.溶解: 收到質粒干(gan)粉后,請加(jia)入 20μl 無(wu)菌(jun)水至(zhi)管底,溶解質粒,室溫靜(jing)置 1min; 2.混合(吸附質粒): 200μl 感受態細(xi)胞 + 質粒 DNA 5~10µl 混勻(yun),冰(bing)上放(fang)置 30min; 3.熱激(ji)導(dao)入: 42℃靜(jing)置 90s; 4.收縮膜(mo)孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復培(pei)(pei)養(yang): 毎管加(jia) 800µl LB 液體培(pei)(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang): 將適當體積(100 µl)的復蘇細(xi)胞,涂布在相應抗(kang)(kang)性的 LB 平板上,正置平皿(min) 30min(瓊(qiong)脂面務必干(gan)燥后), 倒置培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出(chu)現(xian)菌(jun)落。 7.提取: 挑取單克隆菌(jun)落至(zhi)相應抗(kang)(kang)性 LB 液體培(pei)(pei)養(yang)基中(zhong),震蕩培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗需要提取質粒。
生長條(tiao)件(jian)
LB+氨芐青霉(mei)素,37℃,克隆菌株BL21(DE3)
存(cun)儲條件(jian)
2-8℃
安全(quan)等級
1
應(ying)用領域
質粒載體
共享方式
公(gong)益性共(gong)享
