商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-32a(+)-ORF10質粒
英文名稱
pET-32a(+)-ORF10 plasmid
規格
質粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1275
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶(rong)解: 收到質粒(li)干(gan)粉后(hou),請加入 20μl 無(wu)菌水(shui)至(zhi)管底(di),溶(rong)解質粒(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸(xi)附質粒(li)): 200μl 感(gan)受態細胞 + 質粒(li) DNA 5~10μl 混勻,冰(bing)上放(fang)置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱(re)激(ji)導入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔(kong): 冰(bing)浴(yu) 2min; 5.修復培(pei)養(yang)(yang)(yang): 毎管加 800μl LB 液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang)(yang)(yang): 將適(shi)當(dang)體(ti)積(100 μl)的(de)復蘇細胞,涂布在(zai)相(xiang)應抗性(xing)的(de) LB 平(ping)板上,正置(zhi)(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干(gan)燥后(hou)), 倒(dao)置(zhi)(zhi)培(pei)養(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現(xian)菌落。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單克隆菌落至(zhi)相(xiang)應抗性(xing) LB 液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基中,震(zhen)蕩培(pei)養(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據試(shi)驗需(xu)要提(ti)取(qu)質粒(li)。
生長條(tiao)件
LB+氨芐青霉素,37℃,克隆菌株BL21(DE3)
存儲(chu)條(tiao)件
2-8℃
安全等(deng)級
1
應(ying)用領域
質粒(li)載體
共享(xiang)方式
公益性共(gong)享
