商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-32a(+)-ORF3A質粒
英文名稱
pET-32a(+)-ORF3A plasmid
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1276
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解(jie): 收(shou)到質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)干(gan)粉后(hou),請加(jia)入 20μl 無菌水至管底,溶解(jie)質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li),室溫靜(jing)置 1min; 2.混合(吸附質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)): 200μl 感受態(tai)細胞 + 質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放置 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復培(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管加(jia) 800µl LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang)(yang): 將(jiang)適當體積(100 µl)的復蘇細胞,涂布在相應抗性的 LB 平(ping)板上,正置平(ping)皿 30min(瓊(qiong)脂面務必干(gan)燥(zao)后(hou)), 倒置培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出(chu)現菌落。 7.提取: 挑取單克隆菌落至相應抗性 LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基中(zhong),震蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要提取質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)。
生長條件(jian)
LB+氨芐青霉(mei)素(su),37℃,克(ke)隆(long)菌株BL21(DE3)
存儲條件
2-8℃
安全等級(ji)
1
應用領(ling)域
質(zhi)粒載(zai)體(ti)
共享方式(shi)
公益性共享(xiang)
