商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-32a(+)-ORF6質粒
英文名稱
pET-32a(+)-ORF6 plasmid
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1277
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶解(jie): 收到質(zhi)(zhi)(zhi)粒干(gan)粉后,請(qing)加入(ru) 20μl 無菌水至管(guan)底(di),溶解(jie)質(zhi)(zhi)(zhi)粒,室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸(xi)附(fu)質(zhi)(zhi)(zhi)粒): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)(zhi)(zhi)粒 DNA 5~10µl 混勻(yun),冰上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修(xiu)復(fu)培(pei)養(yang)(yang)(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體(ti)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang)(yang)(yang): 將(jiang)適當體(ti)積(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂(tu)布在(zai)相(xiang)(xiang)應抗(kang)性的 LB 平(ping)板上,正置(zhi)(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干(gan)燥后), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)養(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取: 挑(tiao)取單克隆(long)菌落至相(xiang)(xiang)應抗(kang)性 LB 液體(ti)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)養(yang)(yang)(yang) 12-16h,根(gen)據試驗需要提取質(zhi)(zhi)(zhi)粒。
生長條(tiao)件
LB+氨芐(xia)青霉素,37℃,克隆菌株BL21(DE3)
存儲條件
2-8℃
安全等級
1
應用領域
質(zhi)粒載體
共享方式
公益性共享(xiang)
