商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-32a(+)-ORF7A質粒
英文名稱
pET-32a(+)-ORF7A plasmid
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1278
商品詳情
培養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收(shou)到(dao)質粒(li)干粉后(hou),請加入 20μl 無菌(jun)水(shui)至(zhi)管(guan)底,溶解質粒(li),室溫靜(jing)(jing)置(zhi) 1min; 2.混(hun)合(he)(吸附質粒(li)): 200μl 感受(shou)態細胞 + 質粒(li) DNA 5~10μl 混(hun)勻,冰(bing)(bing)上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)(jing)置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜(mo)孔(kong): 冰(bing)(bing)浴 2min; 5.修復培(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管(guan)加 800μl LB 液(ye)體(ti)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適(shi)當體(ti)積(100 μl)的(de)復蘇細胞,涂布在相(xiang)應(ying)抗(kang)性的(de) LB 平(ping)板(ban)上(shang),正(zheng)置(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干燥后(hou)), 倒(dao)置(zhi)培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)落(luo)。 7.提取: 挑取單克隆(long)菌(jun)落(luo)至(zhi)相(xiang)應(ying)抗(kang)性 LB 液(ye)體(ti)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要(yao)提取質粒(li)。
生(sheng)長(chang)條件(jian)
LB+氨芐青霉素,37℃,克隆菌株BL21(DE3)
存儲條件
2-8℃
安全(quan)等級(ji)
1
應用領域
質粒載(zai)體
共享(xiang)方式(shi)
公益性共享
