商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-32a(+)-ORF8質粒
英文名稱
pET-32a(+)-ORF8 plasmid
規格
質粒(li)干粉(fen)
貨號
BJ-J1279
商品詳情
培養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方(fang)法(fa)
1.溶(rong)解(jie): 收到質(zhi)粒干粉后,請加入(ru) 20μl 無菌(jun)水(shui)至(zhi)管(guan)底,溶(rong)解(jie)質(zhi)粒,室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒): 200μl 感受態細(xi)(xi)胞 + 質(zhi)粒 DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上放(fang)置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔(kong): 冰(bing)浴 2min; 5.修(xiu)復培(pei)養: 毎管(guan)加 800µl LB 液體(ti)培(pei)養基,37 ℃培(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養: 將適當體(ti)積(100 µl)的復蘇細(xi)(xi)胞,涂布在相(xiang)應(ying)抗性(xing)的 LB 平板上,正置(zhi)(zhi)平皿(min) 30min(瓊脂(zhi)面(mian)務(wu)必干燥后), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)養 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取: 挑(tiao)取單克隆菌(jun)落至(zhi)相(xiang)應(ying)抗性(xing) LB 液體(ti)培(pei)養基中,震蕩(dang)培(pei)養 12-16h,根據(ju)試驗需(xu)要提取質(zhi)粒。
生長(chang)條(tiao)件(jian)
LB+氨芐青霉(mei)素,37℃,克隆菌株BL21(DE3)
存儲(chu)條件
2-8℃
安(an)全等級
1
應(ying)用領域
質粒載體
共享方式
公益性(xing)共享
