商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-32a(+)-ORF8質粒
英文名稱
pET-32a(+)-ORF8 plasmid
規格
質粒干(gan)粉(fen)
貨號
BJ-J1279
商品詳情
培養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法(fa)
1.溶(rong)(rong)解: 收到質粒干粉后,請加入 20μl 無菌水至管(guan)底(di),溶(rong)(rong)解質粒,室(shi)溫靜置(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附質粒): 200μl 感受態(tai)細(xi)胞 + 質粒 DNA 5~10µl 混(hun)勻(yun),冰上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激導(dao)入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang): 毎(mei)管(guan)加 800µl LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang): 將適當體積(100 µl)的復(fu)蘇(su)細(xi)胞,涂布在(zai)相應抗(kang)性(xing)的 LB 平(ping)板(ban)上(shang),正置(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干燥后), 倒(dao)置(zhi)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang) 12-16h,出(chu)現菌落(luo)。 7.提取: 挑取單(dan)克隆菌落(luo)至相應抗(kang)性(xing) LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要提取質粒。
生長(chang)條件
LB+氨芐青霉素,37℃,克(ke)隆菌株BL21(DE3)
存儲條(tiao)件(jian)
2-8℃
安全等(deng)級(ji)
1
應用領域(yu)
質粒載(zai)體
共享方式
公益性(xing)共(gong)享(xiang)
