商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-32a(+)-Proteinase-3CL-pro質粒
英文名稱
pET-32a(+)-Proteinase-3CL-pro plasmid
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1280
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法(fa)
1.溶解(jie): 收到質粒(li)干粉后(hou),請加(jia)入 20μl 無菌水至(zhi)管底,溶解(jie)質粒(li),室溫靜(jing)置 1min; 2.混(hun)合(he)(吸(xi)附質粒(li)): 200μl 感受態細(xi)胞(bao) + 質粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上(shang)放置 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復(fu)培(pei)養(yang): 毎(mei)管加(jia) 800µl LB 液體(ti)培(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang): 將(jiang)適(shi)當(dang)體(ti)積(100 µl)的復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao),涂布在相應(ying)抗(kang)性的 LB 平板上(shang),正置平皿 30min(瓊脂面務必干燥(zao)后(hou)), 倒置培(pei)養(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提(ti)取(qu): 挑(tiao)取(qu)單克隆菌落至(zhi)相應(ying)抗(kang)性 LB 液體(ti)培(pei)養(yang)基中,震(zhen)蕩培(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗需要(yao)提(ti)取(qu)質粒(li)。
生長條件
LB+氨芐青(qing)霉素,37℃,克隆(long)菌株BL21(DE3)
存儲條件(jian)
2-8℃
安全等級(ji)
1
應用領(ling)域(yu)
質粒載體(ti)
共享方式(shi)
公(gong)益性共享
