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pET-32a(+)-RNA-directed-RNA-polymerase質粒
pET-32a(+)-RNA-directed-RNA-polymerase質粒
商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-32a(+)-RNA-directed-RNA-polymerase質粒
英文名稱
pET-32a(+)-RNA-directed-RNA-polymerase plasmid
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1281
商品詳情
培養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解(jie): 收(shou)到質(zhi)粒(li)(li)干粉后,請加(jia)入(ru)(ru) 20μl 無菌(jun)水(shui)至(zhi)管(guan)底,溶解(jie)質(zhi)粒(li)(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻(yun),冰上放(fang)置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱(re)激(ji)導入(ru)(ru): 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮(suo)膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復(fu)培(pei)養(yang): 毎管(guan)加(jia) 800µl LB 液(ye)(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選(xuan)培(pei)養(yang): 將適當體(ti)積(ji)(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂布(bu)在相應(ying)抗(kang)性(xing)的 LB 平板上,正置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干燥(zao)后), 倒(dao)置(zhi)(zhi)培(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取: 挑取單(dan)克隆菌(jun)落至(zhi)相應(ying)抗(kang)性(xing) LB 液(ye)(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基中,震(zhen)蕩培(pei)養(yang) 12-16h,根(gen)據試驗需要(yao)提取質(zhi)粒(li)(li)。
生長條件
LB+氨芐(xia)青霉素,37℃,克隆菌株BL21(DE3)
存儲條件
2-8℃
安(an)全等級
1
應(ying)用領域
質粒(li)載體
共享方式
公益性共享
