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pET-32a(+)-RNA-directed-RNA-polymerase質粒





pET-32a(+)-RNA-directed-RNA-polymerase質粒

  • 商品貨號:BJ-J1281
    商品庫存: 100
  • 商品品牌:邦景/BHBT
  • 上架時間:2023-07-10
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商品描述:

商品屬性

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產品名稱

pET-32a(+)-RNA-directed-RNA-polymerase質粒

 英文名稱

pET-32a(+)-RNA-directed-RNA-polymerase plasmid

 規格

 質粒干粉

 貨號

BJ-J1281


商品詳情

培養基(ji)

酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)

傳代方法

1.溶解(jie): 收(shou)到質(zhi)粒(li)(li)干粉后,請加(jia)入(ru)(ru) 20μl 無菌(jun)水(shui)至(zhi)管(guan)底,溶解(jie)質(zhi)粒(li)(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻(yun),冰上放(fang)置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱(re)激(ji)導入(ru)(ru): 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮(suo)膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復(fu)培(pei)養(yang): 毎管(guan)加(jia) 800µl LB 液(ye)(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選(xuan)培(pei)養(yang): 將適當體(ti)積(ji)(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂布(bu)在相應(ying)抗(kang)性(xing)的 LB 平板上,正置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干燥(zao)后), 倒(dao)置(zhi)(zhi)培(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取: 挑取單(dan)克隆菌(jun)落至(zhi)相應(ying)抗(kang)性(xing) LB 液(ye)(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基中,震(zhen)蕩培(pei)養(yang) 12-16h,根(gen)據試驗需要(yao)提取質(zhi)粒(li)(li)。

生長條件

LB+氨芐(xia)青霉素,37℃,克隆菌株BL21(DE3)

存儲條件

2-8℃

安(an)全等級

1

應(ying)用領域

質粒(li)載體

共享方式

公益性共享

 

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