商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET32a-MS2(phage)
英文名稱
pET32a-MS2(phage)
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1283
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶(rong)解: 收到質(zhi)粒(li)干粉后,請加入 20μl 無菌水(shui)至管(guan)底,溶(rong)解質(zhi)粒(li),室溫靜(jing)置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸(xi)附質(zhi)粒(li)): 200μl 感(gan)受態細胞 + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上(shang)放(fang)置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復培(pei)養: 毎管(guan)加 800µl LB 液(ye)體培(pei)養基,37 ℃培(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選(xuan)培(pei)養: 將適(shi)當體積(100 µl)的復蘇(su)細胞,涂布在相(xiang)(xiang)應抗性的 LB 平(ping)板(ban)上(shang),正置(zhi)(zhi)平(ping)皿 30min(瓊(qiong)脂面(mian)務必(bi)干燥后), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)養 12-16h,出(chu)現菌落(luo)。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆(long)菌落(luo)至相(xiang)(xiang)應抗性 LB 液(ye)體培(pei)養基中,震(zhen)蕩培(pei)養 12-16h,根據試驗需要提取(qu)質(zhi)粒(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌(jun)株DH5α,1797bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應(ying)用(yong)領域
載體宿主:大腸桿菌,載體用途:蛋白表達,基因種屬:噬菌體,基因類型:ORF,原核抗性:Amp,熒光蛋白:未知。
共享方式
公(gong)益(yi)性共享
