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pET32a-RbcS(Laminaria japonica Aresch)
pET32a-RbcS(Laminaria japonica Aresch)
商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET32a-RbcS(Laminaria japonica Aresch)
英文名稱
pET32a-RbcS(Laminaria japonica Aresch)
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1285
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶解: 收(shou)(shou)到質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)干粉后,請加入(ru) 20μl 無菌水至管底(di),溶解質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li),室溫靜(jing)置(zhi) 1min; 2.混合(he)(吸(xi)附質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)): 200μl 感(gan)受態細胞 + 質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜(jing)置(zhi) 90s; 4.收(shou)(shou)縮膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang): 毎管加 800µl LB 液體培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang): 將適當體積(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂布在相(xiang)(xiang)應抗性的 LB 平板上,正置(zhi)平皿(min) 30min(瓊(qiong)脂面(mian)務必干燥(zao)后), 倒置(zhi)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取: 挑取單克隆菌落至相(xiang)(xiang)應抗性 LB 液體培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗需要提取質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克(ke)隆菌(jun)株DH5α,417bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級(ji)
0
應用領域
載體宿主:大腸桿菌,載體用途:蛋白表達,基因種屬:未知,基因類型:ORF,原核抗性:Amp,熒光蛋白:未知。
共享方式
公(gong)益性共享(xiang)
