商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-SUMO-DFNA5(human)-6×His
英文名稱
pET-SUMO-DFNA5(human)-6×His
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1288
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收(shou)到(dao)質(zhi)粒(li)(li)干(gan)粉(fen)后(hou)(hou),請(qing)加入 20μl 無菌水至(zhi)管底,溶解質(zhi)粒(li)(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸(xi)附質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上(shang)放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱(re)激導入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復培養(yang)(yang): 毎(mei)管加 800µl LB 液體(ti)培養(yang)(yang)基,37 ℃培養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yang)(yang): 將適當體(ti)積(100 µl)的復蘇(su)細胞,涂布在相(xiang)應抗性(xing)(xing)的 LB 平(ping)(ping)板(ban)上(shang),正置(zhi)(zhi)平(ping)(ping)皿(min) 30min(瓊脂面務必(bi)干(gan)燥后(hou)(hou)), 倒置(zhi)(zhi)培養(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆(long)菌落至(zhi)相(xiang)應抗性(xing)(xing) LB 液體(ti)培養(yang)(yang)基中,震蕩(dang)培養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需(xu)要提取(qu)質(zhi)粒(li)(li)。
生(sheng)長(chang)條(tiao)件(jian)
LB +卡那霉素,37℃(克隆菌株DH5α,1488bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
載體宿主:大腸桿菌,載體用途:蛋白表達,基因種屬:人,基因類型:ORF,原核抗性:Kan,熒光蛋白:未知。
共(gong)享方(fang)式
公益性(xing)共享
