商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pet-sumo載體
英文名稱
pet-sumo載(zai)體
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1289
商品詳情
培(pei)養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方(fang)法(fa)
1.溶(rong)解: 收(shou)到質(zhi)粒(li)干粉后,請(qing)加入(ru) 20μl 無(wu)菌(jun)水(shui)至(zhi)管底,溶(rong)解質(zhi)粒(li),室溫靜(jing)置(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸(xi)附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態(tai)細胞 + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10μl 混(hun)勻(yun),冰上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導入(ru): 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔(kong): 冰浴 2min; 5.修復培(pei)養(yang): 毎管加 800μl LB 液體培(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang): 將(jiang)適當體積(100 μl)的復蘇細胞,涂(tu)布在相(xiang)(xiang)應抗(kang)(kang)性的 LB 平(ping)(ping)板(ban)上,正置(zhi)(zhi)平(ping)(ping)皿 30min(瓊脂面務必(bi)干燥后), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取: 挑取單克隆菌(jun)落至(zhi)相(xiang)(xiang)應抗(kang)(kang)性 LB 液體培(pei)養(yang)基中,震蕩(dang)培(pei)養(yang) 12-16h,根(gen)據試驗需要(yao)提取質(zhi)粒(li)。
生長(chang)條件
LB +卡那(nei)霉(mei)素,37℃(克隆(long)菌株DH5α,啟動(dong)子:T7 復制子:pBR322 )
存儲(chu)條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
科(ke)研(yan)
共享方(fang)式
公益性共享
