商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pFA6a-kanMX6
英文名稱
pFA6a-kanMX6
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1290
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶解(jie): 收到質(zhi)(zhi)粒(li)干粉后,請加入 20μl 無(wu)菌水(shui)至(zhi)管(guan)底,溶解(jie)質(zhi)(zhi)粒(li),室溫靜(jing)置(zhi) 1min; 2.混合(吸(xi)附(fu)質(zhi)(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細胞(bao) + 質(zhi)(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液(ye)體(ti)(ti)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選(xuan)培(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適(shi)當體(ti)(ti)積(100 µl)的(de)復(fu)蘇細胞(bao),涂布在(zai)相應抗(kang)性(xing)的(de) LB 平板上(shang),正置(zhi)平皿(min) 30min(瓊(qiong)脂(zhi)面務(wu)必干燥后), 倒(dao)置(zhi)培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提(ti)取: 挑取單(dan)克隆菌落至(zhi)相應抗(kang)性(xing) LB 液(ye)體(ti)(ti)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震(zhen)蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試(shi)驗(yan)需要提(ti)取質(zhi)(zhi)粒(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆(long)菌株DH5α)
存儲條件
2-8℃
安(an)全等(deng)級
0
應用領域
科研(yan)
共(gong)享方式
公益性共享
