商品屬性：

產品名稱	pFastBacHTB
英文名稱	pFastBacHTB
規格	質粒干(gan)粉
貨號	BJ-J1291

商品詳情

培(pei)養基	酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，pH：7.0(25℃)
傳(chuan)代方(fang)法	1.溶解(jie)(jie)： 收到(dao)質(zhi)粒干(gan)粉后(hou)，請加入(ru) 20μl 無菌(jun)水至管(guan)底，溶解(jie)(jie)質(zhi)粒，室溫靜(jing)置(zhi)(zhi) 1min； 2.混(hun)合（吸附質(zhi)粒）： 200μl 感受(shou)態(tai)細(xi)胞 + 質(zhi)粒 DNA 5~10µl 混(hun)勻(yun)，冰上放置(zhi)(zhi) 30min； 3.熱激導入(ru)： 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi) 90s； 4.收縮膜孔(kong)： 冰浴(yu) 2min； 5.修復培養(yang)(yang)(yang)： 毎管(guan)加 800µl LB 液(ye)體(ti)培養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)，37 ℃培養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min； 6.篩選(xuan)培養(yang)(yang)(yang)： 將適當體(ti)積（100 µl）的(de)復蘇細(xi)胞，涂(tu)布在相(xiang)應(ying)抗性(xing)的(de) LB 平板(ban)上，正置(zhi)(zhi)平皿 30min（瓊(qiong)脂面務必干(gan)燥后(hou)）， 倒置(zhi)(zhi)培養(yang)(yang)(yang) 12-16h，出現菌(jun)落(luo)。 7.提取(qu)： 挑(tiao)取(qu)單克(ke)隆菌(jun)落(luo)至相(xiang)應(ying)抗性(xing) LB 液(ye)體(ti)培養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)中，震蕩培養(yang)(yang)(yang) 12-16h，根據試驗需要(yao)提取(qu)質(zhi)粒。
生長條(tiao)件(jian)	LB +氨(an)芐青霉素，37℃（克隆菌(jun)株DH5α，4857bp ,啟動子PH）
存儲條件	2-8℃
安全等級	0
應用(yong)領域	科研
共(gong)享方式	公益性共享