商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pFastBacHTB
英文名稱
pFastBacHTB
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1291
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解(jie): 收(shou)到質粒(li)(li)干粉后(hou),請加(jia)(jia)入 20μl 無菌水至管(guan)底,溶解(jie)質粒(li)(li),室溫靜(jing)置(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸(xi)附質粒(li)(li)): 200μl 感受態細(xi)胞(bao)(bao) + 質粒(li)(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰(bing)上放(fang)置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復培(pei)養(yang)(yang)(yang): 毎管(guan)加(jia)(jia) 800µl LB 液體(ti)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji),37 ℃培(pei)養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang)(yang)(yang): 將(jiang)適(shi)當體(ti)積(ji)(100 µl)的復蘇細(xi)胞(bao)(bao),涂(tu)布在相應抗性(xing)的 LB 平板上,正置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊(qiong)脂面務必(bi)干燥后(hou)), 倒(dao)置(zhi)(zhi)培(pei)養(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取(qu): 挑(tiao)取(qu)單克隆菌落至相應抗性(xing) LB 液體(ti)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)中(zhong),震(zhen)蕩培(pei)養(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需(xu)要提取(qu)質粒(li)(li)。
生長(chang)條件(jian)
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆(long)菌株DH5α,4857bp ,啟(qi)動子PH)
存(cun)儲條件
2-8℃
安全等級
0
應(ying)用領域
科研
共享方式
公(gong)益性共(gong)享
