商品描述:
商品屬性
商品描述:
商品屬性
商品屬性:
產品名稱
pFastBacHTC
英文名稱
pFastBacHTC
規格
質粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1292
商品詳情
培養(yang)基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收到質粒(li)干粉(fen)后(hou),請加(jia)入 20μl 無菌水至(zhi)(zhi)管底,溶解質粒(li),室溫靜置(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附(fu)質粒(li)): 200μl 感受(shou)態細胞 + 質粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜(mo)孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)養(yang)(yang): 毎管加(jia) 800µl LB 液(ye)體培(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang)(yang): 將(jiang)適當(dang)體積(100 µl)的(de)(de)復(fu)蘇(su)細胞,涂布在相應抗性的(de)(de) LB 平(ping)板(ban)上,正(zheng)置(zhi)平(ping)皿(min) 30min(瓊脂面務必干燥后(hou)), 倒置(zhi)培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出(chu)現菌落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌落至(zhi)(zhi)相應抗性 LB 液(ye)體培(pei)養(yang)(yang)基中,震(zhen)蕩培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根(gen)據(ju)試(shi)驗需要提取(qu)質粒(li)。
生(sheng)長(chang)條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株(zhu)DH5α,啟動子:PH ,復制子:pUC )
存儲(chu)條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
科研(yan)
共享方式
公益性共(gong)享
