商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pFastBacHTC
英文名稱
pFastBacHTC
規格
質粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1292
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方(fang)法
1.溶(rong)解: 收(shou)到質(zhi)粒(li)(li)干(gan)粉后(hou),請加入 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管(guan)底,溶(rong)解質(zhi)粒(li)(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸(xi)附質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰(bing)上放(fang)置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導(dao)入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮(suo)膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)養: 毎管(guan)加 800µl LB 液體(ti)(ti)培(pei)(pei)養基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養: 將(jiang)適當體(ti)(ti)積(ji)(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂布在相(xiang)應抗(kang)性的 LB 平(ping)板上,正置(zhi)(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干(gan)燥后(hou)), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養 12-16h,出(chu)現菌(jun)落(luo)。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單克(ke)隆菌(jun)落(luo)至(zhi)相(xiang)應抗(kang)性 LB 液體(ti)(ti)培(pei)(pei)養基(ji)中,震蕩(dang)培(pei)(pei)養 12-16h,根據試驗(yan)需(xu)要(yao)提(ti)取(qu)質(zhi)粒(li)(li)。
生長(chang)條(tiao)件
LB +氨芐青(qing)霉素,37℃(克隆菌(jun)株DH5α,啟(qi)動子:PH ,復(fu)制子:pUC )
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用(yong)領域
科研
共(gong)享方式
公(gong)益性共享
