商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pGADT7-Rec
英文名稱
pGADT7-Rec
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1293
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方(fang)法
1.溶解(jie)(jie): 收到質(zhi)粒干粉后,請加入 20μl 無(wu)菌水至管底,溶解(jie)(jie)質(zhi)粒,室溫靜置 1min; 2.混合(吸(xi)附質(zhi)粒): 200μl 感(gan)受態(tai)細胞(bao) + 質(zhi)粒 DNA 5~10µl 混勻,冰上放(fang)置 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)(pei)養(yang): 毎(mei)管加 800µl LB 液體培(pei)(pei)(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培(pei)(pei)(pei)養(yang): 將(jiang)適當體積(100 µl)的(de)復(fu)蘇細胞(bao),涂布(bu)在(zai)相(xiang)應(ying)抗性(xing)的(de) LB 平板上,正置平皿 30min(瓊脂(zhi)面務必干燥后), 倒置培(pei)(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取(qu)(qu): 挑取(qu)(qu)單克隆(long)菌落至相(xiang)應(ying)抗性(xing) LB 液體培(pei)(pei)(pei)養(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試(shi)驗需要提取(qu)(qu)質(zhi)粒。
生(sheng)長條件(jian)
LB +氨芐(xia)青霉素,37℃(克隆菌(jun)株DH5α,8058bp ,啟(qi)動子:ADH1 復制子:2U )
存(cun)儲(chu)條件
2-8℃
安(an)全等級
0
應用領域
科研
共享方式
公(gong)益(yi)性(xing)共享
