商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pGADT7-Rec
英文名稱
pGADT7-Rec
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1293
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶(rong)解(jie): 收到質(zhi)粒(li)干(gan)粉后,請加入 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管(guan)底,溶(rong)解(jie)質(zhi)粒(li),室溫靜置(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附(fu)質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細(xi)胞 + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上放(fang)置(zhi) 30min; 3.熱(re)激(ji)導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復培養: 毎管(guan)加 800µl LB 液體(ti)(ti)培養基,37 ℃培養 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選(xuan)培養: 將適(shi)當(dang)體(ti)(ti)積(100 µl)的(de)復蘇細(xi)胞,涂(tu)布在相(xiang)應抗性的(de) LB 平(ping)板上,正(zheng)置(zhi)平(ping)皿(min) 30min(瓊脂面務必(bi)干(gan)燥后), 倒置(zhi)培養 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)落至(zhi)相(xiang)應抗性 LB 液體(ti)(ti)培養基中,震(zhen)蕩培養 12-16h,根據試驗需(xu)要提取(qu)質(zhi)粒(li)。
生長(chang)條件(jian)
LB +氨芐青霉(mei)素(su),37℃(克隆菌株DH5α,8058bp ,啟動子(zi):ADH1 復制子(zi):2U )
存(cun)儲條件
2-8℃
安全等級
0
應(ying)用領域
科(ke)研
共享方式
公(gong)益性共享(xiang)
