商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pGL4.29[luc2P-CRE-Hygro]
英文名稱
pGL4.29[luc2P-CRE-Hygro]
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1296
商品詳情
培養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶解: 收到質(zhi)(zhi)粒(li)(li)干粉(fen)后,請加入(ru) 20μl 無菌水至管底,溶解質(zhi)(zhi)粒(li)(li),室溫靜置 1min; 2.混(hun)合(吸附質(zhi)(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感(gan)受態細胞 + 質(zhi)(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上(shang)放(fang)置 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜置 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修(xiu)復(fu)培(pei)養(yang): 毎管加 800µl LB 液(ye)體培(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang): 將適(shi)當體積(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂布(bu)在相(xiang)應抗(kang)性(xing)的 LB 平板上(shang),正置平皿 30min(瓊脂面務必干燥后), 倒置培(pei)養(yang) 12-16h,出(chu)現菌落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌落至相(xiang)應抗(kang)性(xing) LB 液(ye)體培(pei)養(yang)基中,震蕩培(pei)養(yang) 12-16h,根據試(shi)驗(yan)需要提取(qu)質(zhi)(zhi)粒(li)(li)。
生(sheng)長(chang)條(tiao)件
LB +氨芐青霉素(su),37℃(克隆菌株DH5α,6084bp)
存儲條件
2-8℃
安全(quan)等級
0
應用領域(yu)
科研(yan)
共享方式
公益性共享
