商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pHIS1525
英文名稱
pHIS1525
規格
質粒干粉(fen)
貨號
BJ-J1300
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶(rong)解: 收到(dao)質(zhi)粒(li)(li)干粉(fen)后,請加(jia)入 20μl 無菌水至管底,溶(rong)解質(zhi)粒(li)(li),室溫靜(jing)置 1min; 2.混(hun)(hun)合(吸附質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態(tai)細(xi)(xi)胞 + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混(hun)(hun)勻,冰(bing)上放置 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置 90s; 4.收縮膜(mo)孔(kong): 冰(bing)浴 2min; 5.修(xiu)復(fu)培(pei)(pei)養: 毎管加(jia) 800µl LB 液(ye)體培(pei)(pei)養基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養: 將適當體積(100 µl)的復(fu)蘇細(xi)(xi)胞,涂(tu)布在相應抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(瓊脂面(mian)務(wu)必干燥后), 倒置培(pei)(pei)養 12-16h,出現菌落。 7.提取(qu)(qu): 挑取(qu)(qu)單(dan)克隆菌落至相應抗性 LB 液(ye)體培(pei)(pei)養基(ji)中,震蕩培(pei)(pei)養 12-16h,根(gen)據(ju)試驗需要(yao)提取(qu)(qu)質(zhi)粒(li)(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌(jun)株DH5α)
存儲條(tiao)件
2-8℃
安(an)全等級
0
應用領域
科研
共享方式
公(gong)益性共(gong)享
