商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pHT01
英文名稱
pHT01
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1302
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代(dai)方法
1.溶解: 收(shou)到質(zhi)(zhi)粒干(gan)粉后(hou),請(qing)加入 20μl 無菌水至管底,溶解質(zhi)(zhi)粒,室溫靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)(zhi)粒): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)(zhi)粒 DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜(mo)孔(kong): 冰(bing)浴 2min; 5.修復培(pei)養(yang)(yang): 毎(mei)管加 800µl LB 液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang)(yang): 將適(shi)當體(ti)積(100 µl)的(de)復蘇細胞,涂布在(zai)相應抗性的(de) LB 平板上,正置(zhi)平皿 30min(瓊脂(zhi)面務必干(gan)燥后(hou)), 倒置(zhi)培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提(ti)(ti)取(qu): 挑取(qu)單克隆菌落至相應抗性 LB 液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根(gen)據試驗(yan)需要提(ti)(ti)取(qu)質(zhi)(zhi)粒。
生長條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株DH5a,7956bp)
存儲(chu)條件
2-8℃
安全等級
1
應用領域
科研
共(gong)享方式
公(gong)益性共享
