商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pHT01
英文名稱
pHT01
規格
質粒(li)干粉
貨號
BJ-J1302
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶(rong)解(jie): 收(shou)到(dao)質粒(li)干(gan)粉后(hou)(hou),請加入 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管(guan)底,溶(rong)解(jie)質粒(li),室溫靜(jing)置(zhi) 1min; 2.混合(吸附(fu)質粒(li)): 200μl 感受態細(xi)胞 + 質粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上放(fang)置(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導入: 42℃靜(jing)置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮(suo)膜孔: 冰(bing)浴(yu) 2min; 5.修(xiu)復培(pei)養(yang): 毎(mei)管(guan)加 800µl LB 液體培(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培(pei)養(yang): 將適當體積(100 µl)的復蘇(su)細(xi)胞,涂布在相(xiang)應抗性(xing)的 LB 平(ping)板上,正置(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務(wu)必干(gan)燥后(hou)(hou)), 倒置(zhi)培(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取: 挑取單克隆(long)菌(jun)落至(zhi)相(xiang)應抗性(xing) LB 液體培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong),震蕩培(pei)養(yang) 12-16h,根(gen)據試驗(yan)需(xu)要提取質粒(li)。
生長條件
LB +氨芐青(qing)霉素,37℃(克隆菌株DH5a,7956bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
1
應用(yong)領域
科研
共享(xiang)方式
公(gong)益(yi)性共(gong)享
