商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pht43
英文名稱
pht43
規格
質(zhi)粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1304
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收(shou)到質(zhi)粒(li)(li)干(gan)粉后,請加入 20μl 無菌水至管底,溶解質(zhi)粒(li)(li),室溫靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受(shou)態細(xi)胞(bao) + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10μl 混勻(yun),冰上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復培養(yang)(yang)(yang): 毎管加 800μl LB 液體(ti)(ti)培養(yang)(yang)(yang)基,37 ℃培養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培養(yang)(yang)(yang): 將適當體(ti)(ti)積(ji)(100 μl)的復蘇細(xi)胞(bao),涂布在相(xiang)(xiang)應抗(kang)性(xing)的 LB 平板上,正置(zhi)平皿 30min(瓊脂面(mian)務必干(gan)燥(zao)后), 倒置(zhi)培養(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現(xian)菌落(luo)(luo)。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌落(luo)(luo)至相(xiang)(xiang)應抗(kang)性(xing) LB 液體(ti)(ti)培養(yang)(yang)(yang)基中(zhong),震蕩(dang)培養(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要(yao)提取(qu)質(zhi)粒(li)(li)。
生(sheng)長條件
LB +氨芐青霉(mei)素(su),37℃(克隆菌株DH5a,8057bp)
存儲條件(jian)
2-8℃
安全等級
0
應用領域
科研
共享(xiang)方式
公益(yi)性共享
