商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pht43
英文名稱
pht43
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1304
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶解: 收到質(zhi)粒干粉后,請加(jia)入(ru)(ru) 20μl 無菌水至(zhi)(zhi)管(guan)底,溶解質(zhi)粒,室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(he)(吸(xi)附質(zhi)粒): 200μl 感受態細(xi)胞(bao) + 質(zhi)粒 DNA 5~10μl 混勻,冰(bing)上(shang)放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru)(ru): 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜(mo)孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)養(yang)(yang): 毎管(guan)加(jia) 800μl LB 液(ye)體培(pei)養(yang)(yang)基(ji),37 ℃培(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang)(yang): 將適(shi)當體積(100 μl)的復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao),涂布在相(xiang)應抗性(xing)的 LB 平板上(shang),正(zheng)置(zhi)(zhi)平皿(min) 30min(瓊脂面務(wu)必干燥后), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提(ti)取: 挑(tiao)取單克隆菌落至(zhi)(zhi)相(xiang)應抗性(xing) LB 液(ye)體培(pei)養(yang)(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據(ju)試驗需(xu)要提(ti)取質(zhi)粒。
生(sheng)長條件
LB +氨(an)芐(xia)青霉素,37℃(克隆菌株DH5a,8057bp)
存儲條(tiao)件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
科研
共享方式
公益性共享(xiang)
