商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pk18mobsacB
英文名稱
pk18mobsacB
規格
質(zhi)粒(li)干粉
貨號
BJ-J1308
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收到質粒(li)(li)干粉后,請加入 20μl 無菌(jun)水至管(guan)底,溶解質粒(li)(li),室溫靜(jing)置 1min; 2.混合(吸(xi)附質粒(li)(li)): 200μl 感受態細胞 + 質粒(li)(li) DNA 5~10μl 混勻(yun),冰上放(fang)置 30min; 3.熱激(ji)導(dao)入: 42℃靜(jing)置 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修(xiu)復培養(yang): 毎(mei)管(guan)加 800μl LB 液體培養(yang)基(ji),37 ℃培養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yang): 將適當體積(100 μl)的復蘇細胞,涂(tu)布在相應抗(kang)性(xing)的 LB 平(ping)(ping)板上,正置平(ping)(ping)皿(min) 30min(瓊脂面務(wu)必干燥后), 倒置培養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)落至相應抗(kang)性(xing) LB 液體培養(yang)基(ji)中,震(zhen)蕩培養(yang) 12-16h,根據(ju)試驗需要(yao)提(ti)取(qu)質粒(li)(li)。
生長條件
LB +卡那霉素,37℃(克(ke)隆菌(jun)株DH5α,5719bp)
存(cun)儲條件(jian)
2-8℃
安全等級
1
應用領域
科研
共享方式(shi)
公(gong)益性共享
