商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pK19mobsacB
英文名稱
pK19mobsacB
規格
質粒干粉(fen)
貨號
BJ-J1309
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶解(jie): 收到質(zhi)粒(li)干(gan)粉后,請加入 20μl 無菌(jun)(jun)水(shui)至(zhi)管底,溶解(jie)質(zhi)粒(li),室溫(wen)靜置 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細(xi)胞(bao) + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放置 30min; 3.熱激(ji)導入: 42℃靜置 90s; 4.收縮膜孔(kong): 冰浴 2min; 5.修復(fu)(fu)培(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管加 800µl LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適當體積(ji)(100 µl)的復(fu)(fu)蘇細(xi)胞(bao),涂布(bu)在(zai)相應抗性(xing)的 LB 平(ping)板(ban)上,正置平(ping)皿 30min(瓊脂(zhi)面務必干(gan)燥后), 倒置培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)(jun)落。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)(jun)落至(zhi)相應抗性(xing) LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試(shi)驗需要提(ti)取(qu)質(zhi)粒(li)。
生長條件
LB +卡那霉素,37℃(克(ke)隆菌(jun)株DH5a)
存儲(chu)條(tiao)件
2-8℃
安全等級
1
應用(yong)領(ling)域(yu)
科研(yan)
共享(xiang)方(fang)式
公益性共享
