商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pKK232-8大腸pKK系列表達質粒
英文名稱
pKK232-8大腸(chang)pKK系列表達質粒(li)
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1310
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶解: 收到質(zhi)粒(li)干粉后(hou),請加(jia)(jia)入 20μl 無菌水至管底,溶解質(zhi)粒(li),室溫靜(jing)置(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸(xi)附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)(fu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎(mei)管加(jia)(jia) 800µl LB 液體培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適當體積(100 µl)的復(fu)(fu)蘇細胞,涂布在相應抗性(xing)(xing)的 LB 平板上(shang),正置(zhi)平皿 30min(瓊脂面務(wu)必干燥后(hou)), 倒置(zhi)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取(qu)(qu): 挑取(qu)(qu)單(dan)克隆菌落至相應抗性(xing)(xing) LB 液體培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根(gen)據(ju)試驗需要提取(qu)(qu)質(zhi)粒(li)。
生(sheng)長條件
LB +氨芐(xia)青霉素,37℃(克隆(long)菌株DH5α,5094bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
科研
共享(xiang)方(fang)式
公益性共享
