商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pRS403
英文名稱
pRS403
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1327
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶(rong)解(jie): 收(shou)(shou)到質粒(li)干粉(fen)后,請加入(ru) 20μl 無菌水至管(guan)底,溶(rong)解(jie)質粒(li),室溫(wen)靜置(zhi)(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附(fu)質粒(li)): 200μl 感(gan)受態細(xi)胞 + 質粒(li) DNA 5~10µl 混勻(yun),冰上(shang)放置(zhi)(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導(dao)入(ru): 42℃靜置(zhi)(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)(shou)縮膜孔(kong): 冰浴 2min; 5.修復培(pei)(pei)養(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體培(pei)(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培(pei)(pei)養(yang): 將適當體積(100 µl)的(de)復蘇細(xi)胞,涂布在相應抗(kang)性的(de) LB 平板上(shang),正置(zhi)(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊(qiong)脂面務必干燥(zao)后), 倒置(zhi)(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取: 挑取單(dan)克隆菌落至相應抗(kang)性 LB 液體培(pei)(pei)養(yang)基(ji)中,震(zhen)蕩培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗需(xu)要(yao)提取質粒(li)。
生長條件(jian)
LB+氨(an)芐(xia)青(qing)霉(mei)素,37℃(克隆菌(jun)株DH5α)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域(yu)
科研
共享方式
公益(yi)性共享
