商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pRS423
英文名稱
pRS423
規格
質粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1328
商品詳情
培養(yang)基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶(rong)解(jie): 收到(dao)質粒干(gan)(gan)粉后(hou),請(qing)加(jia)入(ru) 20μl 無菌(jun)水至管底,溶(rong)解(jie)質粒,室(shi)溫靜置 1min; 2.混合(吸附質粒): 200μl 感受態(tai)細胞 + 質粒 DNA 5~10µl 混勻,冰上(shang)放(fang)置 30min; 3.熱激導(dao)入(ru): 42℃靜置 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)養(yang): 毎管加(jia) 800µl LB 液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang): 將適當體(ti)積(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂(tu)布在相(xiang)應抗(kang)性的 LB 平(ping)板上(shang),正置平(ping)皿(min) 30min(瓊脂面務(wu)必干(gan)(gan)燥后(hou)), 倒(dao)置培(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落(luo)。 7.提取: 挑取單克隆菌(jun)落(luo)至相(xiang)應抗(kang)性 LB 液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)中,震(zhen)蕩培(pei)養(yang) 12-16h,根據試(shi)驗(yan)需要提取質粒。
生長條件
LB +氨(an)芐(xia)青霉素,37℃(克隆菌株DH5a,5797bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域(yu)
科研
共享方式
公益性共享(xiang)
