商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pRS423
英文名稱
pRS423
規格
質粒干粉(fen)
貨號
BJ-J1328
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶(rong)解: 收到質(zhi)粒(li)(li)干粉后(hou),請加入 20μl 無菌水至(zhi)管(guan)底,溶(rong)解質(zhi)粒(li)(li),室(shi)溫靜置(zhi) 1min; 2.混(hun)(hun)合(吸(xi)附(fu)質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感(gan)受態細(xi)胞 + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混(hun)(hun)勻,冰上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復培養(yang)(yang)(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液(ye)體(ti)培養(yang)(yang)(yang)基(ji),37 ℃培養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培養(yang)(yang)(yang): 將適當體(ti)積(ji)(100 µl)的復蘇細(xi)胞,涂布在(zai)相應抗性(xing)的 LB 平板(ban)上,正置(zhi)平皿 30min(瓊(qiong)脂(zhi)面務必干燥后(hou)), 倒置(zhi)培養(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌落(luo)。 7.提(ti)取: 挑取單克(ke)隆(long)菌落(luo)至(zhi)相應抗性(xing) LB 液(ye)體(ti)培養(yang)(yang)(yang)基(ji)中,震蕩培養(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據試(shi)驗需要提(ti)取質(zhi)粒(li)(li)。
生長條件(jian)
LB +氨芐青霉素,37℃(克(ke)隆(long)菌株DH5a,5797bp)
存儲條件
2-8℃
安全(quan)等級
0
應(ying)用領(ling)域
科研
共享方式(shi)
公益性(xing)共享(xiang)
