商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pRS424
英文名稱
pRS424
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1329
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方(fang)法
1.溶解: 收到質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)干粉后,請(qing)加入 20μl 無菌水(shui)至管(guan)底,溶解質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li),室溫靜置 1min; 2.混合(吸附質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)): 200μl 感受態細(xi)胞(bao) + 質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li) DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上放(fang)置 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復(fu)(fu)培(pei)養(yang)(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體(ti)培(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang)(yang): 將適(shi)當體(ti)積(ji)(100 µl)的復(fu)(fu)蘇細(xi)胞(bao),涂(tu)布在相(xiang)應抗(kang)性的 LB 平(ping)板上,正置平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干燥后), 倒置培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌落(luo)(luo)。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單克隆菌落(luo)(luo)至相(xiang)應抗(kang)性 LB 液體(ti)培(pei)養(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要提(ti)取(qu)質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)。
生長條件(jian)
LB +氨芐青(qing)霉(mei)素,37℃(克(ke)隆菌(jun)株DH5a,5616bp)
存儲條件
2-8℃
安全等(deng)級
0
應用領域
科研
共享方式
公益性共(gong)享
