商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pRS425
英文名稱
pRS425
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1330
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶(rong)解: 收到(dao)質粒(li)干(gan)粉后,請加(jia)入 20μl 無菌(jun)水(shui)至管(guan)底(di),溶(rong)解質粒(li),室溫靜置(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附(fu)質粒(li)): 200μl 感受態細胞(bao) + 質粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰(bing)上放置(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復(fu)培養(yang): 毎管(guan)加(jia) 800µl LB 液體培養(yang)基,37 ℃培養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yang): 將適當(dang)體積(ji)(100 µl)的復(fu)蘇細胞(bao),涂布在相應抗性(xing)的 LB 平(ping)板上,正置(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干(gan)燥后), 倒置(zhi)培養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取: 挑取單(dan)克隆(long)菌(jun)落至相應抗性(xing) LB 液體培養(yang)基中(zhong),震(zhen)蕩培養(yang) 12-16h,根據(ju)試(shi)驗需要提取質粒(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,6849bp ,啟(qi)動子:LEU2,T7,T3 復制子:2U )
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
科研(yan)
共享方(fang)式
公益性共(gong)享
