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商品屬性
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產品名稱
pRS426 phagemid in E. coli
英文名稱
pRS426 phagemid in E. coli
規格
質粒干粉(fen)
貨號
BJ-J1331
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶解: 收到質(zhi)粒干粉(fen)后(hou),請加入 20μl 無菌(jun)水至管(guan)底,溶解質(zhi)粒,室溫靜置 1min; 2.混合(he)(吸附質(zhi)粒): 200μl 感(gan)受態細(xi)胞 + 質(zhi)粒 DNA 5~10µl 混勻,冰上放置 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復培(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適當體積(ji)(100 µl)的復蘇細(xi)胞,涂(tu)布在相(xiang)應抗性的 LB 平(ping)(ping)板上,正置平(ping)(ping)皿 30min(瓊脂面務(wu)必干燥后(hou)), 倒(dao)置培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單克隆(long)菌(jun)落至相(xiang)應抗性 LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震蕩(dang)培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試(shi)驗需要提(ti)取(qu)質(zhi)粒。
生長條件
LB +氨芐青(qing)霉素,37℃(克隆菌株DH5a,5726bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用(yong)領域
科(ke)研
共(gong)享方式(shi)
公益性(xing)共享
