商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pUF1-dCas9-GCN5
英文名稱
pUF1-dCas9-GCN5
規格
質粒干粉(fen)
貨號
BJ-J1348
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶(rong)解(jie): 收到質(zhi)(zhi)粒(li)干粉后(hou)(hou),請加入 20μl 無菌水至管底(di),溶(rong)解(jie)質(zhi)(zhi)粒(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細胞(bao)(bao) + 質(zhi)(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang): 毎(mei)管加 800µl LB 液體培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji),37 ℃培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang): 將適(shi)當體積(100 µl)的復(fu)蘇細胞(bao)(bao),涂布在相應抗(kang)性(xing)的 LB 平板上,正置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂面(mian)務必干燥后(hou)(hou)), 倒(dao)置(zhi)(zhi)培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆(long)菌落至相應抗(kang)性(xing) LB 液體培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據(ju)試(shi)驗需要(yao)提取(qu)質(zhi)(zhi)粒(li)。
生長條件(jian)
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株(zhu)Stbl3,啟(qi)動子(zi):PfHsp86 復制子(zi):pUC )
存儲(chu)條(tiao)件
2-8℃
安全等級(ji)
0
應用領域
科(ke)研
共享方式
公益性共享(xiang)
