商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pUF1-dCas9-Sir2a
英文名稱
pUF1-dCas9-Sir2a
規格
質粒干(gan)粉(fen)
貨號
BJ-J1349
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代(dai)方法
1.溶解: 收到(dao)質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)干粉后(hou),請(qing)加(jia)(jia)入 20μl 無菌水(shui)至(zhi)管底,溶解質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li),室溫靜置 1min; 2.混合(吸附質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)): 200μl 感受(shou)態細胞 + 質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放置 30min; 3.熱(re)激導入: 42℃靜置 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管加(jia)(jia) 800µl LB 液體(ti)(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適當體(ti)(ti)積(100 µl)的(de)復(fu)蘇(su)細胞,涂布在(zai)相(xiang)應(ying)抗(kang)性的(de) LB 平板上,正置平皿 30min(瓊脂面務必干燥后(hou)), 倒置培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提(ti)取: 挑(tiao)取單克隆菌落至(zhi)相(xiang)應(ying)抗(kang)性 LB 液體(ti)(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震(zhen)蕩培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需(xu)要(yao)提(ti)取質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株Stbl3,啟(qi)動子:PfHsp86 ,復制子:pUC )
存儲條件
2-8℃
安(an)全(quan)等(deng)級
0
應用領(ling)域
科研
共享方式
公益性共享(xiang)
