商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pX459 V2.0
英文名稱
pX459 V2.0
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1352
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解(jie): 收到質粒(li)干粉后,請(qing)加入 20μl 無菌水至管(guan)底(di),溶解(jie)質粒(li),室溫(wen)靜(jing)置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質粒(li)): 200μl 感受態細胞 + 質粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置(zhi) 90s; 4.收縮(suo)膜孔: 冰浴 2min; 5.修復培(pei)養(yang)(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體培(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang)(yang): 將適當體積(100 µl)的(de)復蘇細胞,涂布在相應抗(kang)性(xing)的(de) LB 平板(ban)上(shang),正置(zhi)平皿(min) 30min(瓊脂面務必干燥后), 倒置(zhi)培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出(chu)現菌落。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單(dan)克隆菌落至相應抗(kang)性(xing) LB 液體培(pei)養(yang)(yang)基中(zhong),震蕩培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試(shi)驗需要提(ti)取(qu)質粒(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉素(su),37℃(克(ke)隆菌(jun)株Stbl3,動(dong)子:U6 復制子:pUC )
存儲條(tiao)件
2-8℃
安全等級
0
應用領(ling)域
科研
共享方式(shi)
公(gong)益性共享
