商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pX601
英文名稱
pX601
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1353
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法(fa)
1.溶(rong)(rong)解: 收(shou)(shou)到質(zhi)粒(li)干(gan)粉后,請加入 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管底,溶(rong)(rong)解質(zhi)粒(li),室溫靜置 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態(tai)細胞 + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上(shang)放置 30min; 3.熱激(ji)導入: 42℃靜置 90s; 4.收(shou)(shou)縮膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復培養(yang)(yang)(yang)(yang): 毎管加 800µl LB 液體(ti)培養(yang)(yang)(yang)(yang)基,37 ℃培養(yang)(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選(xuan)培養(yang)(yang)(yang)(yang): 將適當體(ti)積(100 µl)的復蘇細胞,涂布在(zai)相應抗性(xing)的 LB 平(ping)板上(shang),正置平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干(gan)燥后), 倒(dao)置培養(yang)(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取: 挑取單克隆菌(jun)落至(zhi)相應抗性(xing) LB 液體(ti)培養(yang)(yang)(yang)(yang)基中(zhong),震蕩培養(yang)(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據(ju)試驗(yan)需要提取質(zhi)粒(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株Stbl3,啟動子(zi):U6,CMV 復制子(zi):pUC )
存儲條件
2-8℃
安(an)全等級
0
應用領域
科研
共享方式(shi)
公益性共享
