Stbl3(含(han)pACT1:Cas9-GFP, U6:sgTK質粒(li))大腸(chang)桿菌(jun)
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- 商品品牌:邦景/BHBT
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- 上架時間:2023-07-12
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產品名稱
Stbl3(含pACT1:Cas9-GFP, U6:sgTK質粒)大腸桿菌
英文名稱
Escherichia coli Stbl3(pACT1:Cas9-GFP, U6:sgTK)
規格
凍干粉(fen)
貨號
BJ-J1366
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代(dai)方法(fa)
1.溶解(jie): 收到質(zhi)(zhi)粒(li)(li)干(gan)(gan)粉后(hou),請加(jia)入 20μl 無菌水(shui)至管(guan)底,溶解(jie)質(zhi)(zhi)粒(li)(li),室溫(wen)靜置(zhi) 1min; 2.混合(he)(吸附質(zhi)(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細胞(bao) + 質(zhi)(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻(yun),冰上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔(kong): 冰浴 2min; 5.修復培(pei)(pei)(pei)養(yang): 毎管(guan)加(jia) 800µl LB 液(ye)體(ti)(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養(yang): 將適當體(ti)(ti)積(100 µl)的復蘇(su)細胞(bao),涂布在相應抗(kang)性的 LB 平(ping)板(ban)上,正置(zhi)平(ping)皿 30min(瓊(qiong)脂(zhi)面務(wu)必干(gan)(gan)燥后(hou)), 倒置(zhi)培(pei)(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提(ti)取(qu)(qu): 挑取(qu)(qu)單(dan)克隆菌落至相應抗(kang)性 LB 液(ye)體(ti)(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)中,震蕩(dang)培(pei)(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試(shi)驗需(xu)要提(ti)取(qu)(qu)質(zhi)(zhi)粒(li)(li)。
生長(chang)條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株Stbl3,9981bp)
存儲(chu)條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
科研
共享方式(shi)
公益性共享
