商品描述:
商品屬性
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產品名稱
昆蟲胞內質粒
英文名稱
pFastBacHTA
規格
質粒干粉(fen)
貨號
BJ-J2212
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法(fa)
1.溶(rong)解(jie)(jie): 收到質(zhi)粒(li)干粉后,請(qing)加(jia)(jia)入 20μl 無菌水至管底,溶(rong)解(jie)(jie)質(zhi)粒(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細胞(bao) + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10μl 混勻,冰上放(fang)置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導(dao)入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復培(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管加(jia)(jia) 800μl LB 液(ye)體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選(xuan)培(pei)(pei)養(yang)(yang): 將(jiang)適(shi)當體積(100 μl)的復蘇(su)細胞(bao),涂布(bu)在相應抗(kang)性的 LB 平板上,正置(zhi)(zhi)平皿(min) 30min(瓊脂(zhi)面(mian)務必干燥后), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現(xian)菌落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌落至相應抗(kang)性 LB 液(ye)體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要提取(qu)質(zhi)粒(li)。
生長條件
LB +氨芐(xia)青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,4856bp,啟動子:PH)
存(cun)儲條(tiao)件
2-8℃
安全等級
0
應用領(ling)域
科研
共享(xiang)方式
公(gong)益(yi)性共(gong)享(xiang)
