商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pLAM12
英文名稱
pLAM12
規格
質粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1312
商品詳情
培養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方(fang)法
1.溶解: 收到質(zhi)粒干粉后,請加入(ru) 20μl 無菌水(shui)至管(guan)底,溶解質(zhi)粒,室溫靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附(fu)質(zhi)粒): 200μl 感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao) + 質(zhi)粒 DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上放置(zhi) 30min; 3.熱(re)激導入(ru): 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)(pei)養: 毎管(guan)加 800µl LB 液體培(pei)(pei)(pei)養基(ji),37 ℃培(pei)(pei)(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養: 將適當(dang)體積(100 µl)的復(fu)蘇細(xi)胞(bao),涂布在相應(ying)抗(kang)性的 LB 平板上,正置(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干燥后), 倒置(zhi)培(pei)(pei)(pei)養 12-16h,出現菌落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單(dan)克隆菌落至相應(ying)抗(kang)性 LB 液體培(pei)(pei)(pei)養基(ji)中,震蕩培(pei)(pei)(pei)養 12-16h,根據(ju)試驗需(xu)要提取(qu)質(zhi)粒。
生長(chang)條(tiao)件
LB +氨芐青霉(mei)素,37℃(克隆菌株DH5α)
存儲條(tiao)件
2-8℃
安全等(deng)級
1
應(ying)用領域
科研
共享方式
公益性共享
