商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pLAM12
英文名稱
pLAM12
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1312
商品詳情
培(pei)養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶(rong)解: 收到(dao)質(zhi)粒(li)干(gan)粉后,請加入 20μl 無菌(jun)(jun)(jun)水至管底,溶(rong)解質(zhi)粒(li),室溫靜置 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細(xi)(xi)胞(bao) + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上放(fang)置 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置 90s; 4.收縮(suo)膜孔: 冰(bing)浴(yu) 2min; 5.修復(fu)培養: 毎管加 800µl LB 液體培養基(ji),37 ℃培養 1h 150 r/min; 6.篩選培養: 將適當體積(ji)(100 µl)的復(fu)蘇細(xi)(xi)胞(bao),涂布在相(xiang)應(ying)(ying)抗性(xing)的 LB 平板上,正(zheng)置平皿 30min(瓊脂面(mian)務必干(gan)燥后), 倒置培養 12-16h,出(chu)現菌(jun)(jun)(jun)落。 7.提取: 挑(tiao)取單克隆菌(jun)(jun)(jun)落至相(xiang)應(ying)(ying)抗性(xing) LB 液體培養基(ji)中,震蕩培養 12-16h,根據試(shi)驗需要提取質(zhi)粒(li)。
生長條件
LB +氨芐(xia)青霉素,37℃(克隆菌株DH5α)
存儲(chu)條(tiao)件
2-8℃
安全等級
1
應用領域
科研
共享方式
公益性共(gong)享(xiang)
