商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pLL3.7
英文名稱
pLL3.7
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1314
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法(fa)
1.溶解: 收到質(zhi)(zhi)粒(li)干(gan)粉后(hou),請加入(ru) 20μl 無菌(jun)水至管(guan)底(di),溶解質(zhi)(zhi)粒(li),室溫(wen)靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附(fu)質(zhi)(zhi)粒(li)): 200μl 感(gan)受態細(xi)(xi)胞 + 質(zhi)(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰(bing)(bing)上放(fang)置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)(bing)浴 2min; 5.修(xiu)復培(pei)(pei)養(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體(ti)(ti)培(pei)(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選(xuan)培(pei)(pei)養(yang): 將(jiang)適當體(ti)(ti)積(100 µl)的(de)復蘇細(xi)(xi)胞,涂布在相應抗性(xing)的(de) LB 平(ping)板上,正置(zhi)(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干(gan)燥后(hou)), 倒(dao)置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單克隆(long)菌(jun)落至相應抗性(xing) LB 液體(ti)(ti)培(pei)(pei)養(yang)基中(zhong),震蕩培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根(gen)據(ju)試驗需要提(ti)取(qu)質(zhi)(zhi)粒(li)。
生長(chang)條件
LB +氨芐青(qing)霉素,37℃(克(ke)隆菌(jun)株Stbl3)
存儲(chu)條件
2-8℃
安全等級
1
應用領域
慢(man)病毒基因干擾質粒
共享方(fang)式
公益性共享
