商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pMD2.G
英文名稱
pMD2.G
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1318
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶解: 收到質粒干粉(fen)后,請加(jia)入 20μl 無(wu)菌(jun)水至(zhi)(zhi)管底,溶解質粒,室溫靜(jing)置(zhi)(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(he)(吸附質粒): 200μl 感受態細胞 + 質粒 DNA 5~10µl 混勻(yun),冰上放置(zhi)(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導(dao)入: 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮(suo)膜孔: 冰浴 2min; 5.修復培(pei)養: 毎管加(jia) 800µl LB 液體(ti)培(pei)養基,37 ℃培(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選(xuan)培(pei)養: 將適當體(ti)積(100 µl)的(de)復蘇細胞,涂布在(zai)相(xiang)應(ying)抗性(xing)的(de) LB 平板上,正置(zhi)(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊(qiong)脂面(mian)務必干燥后), 倒置(zhi)(zhi)(zhi)培(pei)養 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提(ti)取: 挑取單克隆菌(jun)落至(zhi)(zhi)相(xiang)應(ying)抗性(xing) LB 液體(ti)培(pei)養基中,震蕩培(pei)養 12-16h,根據試驗需要提(ti)取質粒。
生(sheng)長(chang)條件(jian)
LB +氨芐青(qing)霉素(su),37℃(克(ke)隆菌株Stbl3,5822bp)
存儲條件(jian)
2-8℃
安全等級
1
應用領(ling)域
科(ke)研(yan)
共享方(fang)式
公益性共享
