商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pPinkα-HC
英文名稱
pPinkα-HC
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1323
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代(dai)方法
1.溶(rong)解(jie): 收(shou)到質粒干(gan)粉(fen)后,請加入(ru) 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管(guan)底,溶(rong)解(jie)質粒,室溫(wen)靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸(xi)附質粒): 200μl 感受態細胞(bao) + 質粒 DNA 5~10µl 混勻,冰上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)養(yang): 毎(mei)管(guan)加 800µl LB 液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang): 將適當(dang)體(ti)積(100 µl)的復(fu)蘇細胞(bao),涂布在相應(ying)抗(kang)性的 LB 平板上,正置(zhi)平皿(min) 30min(瓊(qiong)脂面務必干(gan)燥(zao)后), 倒置(zhi)培(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落(luo)(luo)。 7.提取: 挑取單克隆菌(jun)落(luo)(luo)至(zhi)相應(ying)抗(kang)性 LB 液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗需(xu)要提取質粒。
生長條(tiao)件
LB +氨芐(xia)青(qing)霉素,37℃(克隆菌(jun)株DH5α,7898bp)
存(cun)儲條(tiao)件
2-8℃
安全等(deng)級
0
應用領域
科研
共享方式
公益性(xing)共享
