商品描述:
商品屬性
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產品名稱
PPRE X3-TK-luc
英文名稱
PPRE X3-TK-luc
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1324
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法(fa)
1.溶解: 收到(dao)質粒(li)(li)干粉后,請加入 20μl 無(wu)菌(jun)水至管底,溶解質粒(li)(li),室溫(wen)靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附(fu)質粒(li)(li)): 200μl 感(gan)受態(tai)細(xi)胞(bao) + 質粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上(shang)放(fang)置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修(xiu)復培養(yang)(yang): 毎管加 800µl LB 液體(ti)培養(yang)(yang)基,37 ℃培養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yang)(yang): 將適(shi)當體(ti)積(100 µl)的(de)復蘇細(xi)胞(bao),涂布在相應(ying)抗性的(de) LB 平板(ban)上(shang),正置(zhi)平皿(min) 30min(瓊脂(zhi)面務必(bi)干燥后), 倒(dao)置(zhi)培養(yang)(yang) 12-16h,出(chu)現菌(jun)落。 7.提取: 挑(tiao)取單克隆(long)菌(jun)落至相應(ying)抗性 LB 液體(ti)培養(yang)(yang)基中,震蕩(dang)培養(yang)(yang) 12-16h,根據(ju)試(shi)驗需要提取質粒(li)(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉素(su),37℃(克隆菌株DH5α,6763bp)
存(cun)儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用(yong)領(ling)域
科研
共享方式
公(gong)益性共享
