商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pREDKI
英文名稱
pREDKI
規格
質粒(li)干粉
貨號
BJ-J1325
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶(rong)解(jie): 收到質粒(li)干粉后,請(qing)加(jia)入 20μl 無(wu)菌水至管(guan)底,溶(rong)解(jie)質粒(li),室溫靜(jing)置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質粒(li)): 200μl 感受態細胞(bao) + 質粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導入: 42℃靜(jing)置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管(guan)加(jia) 800µl LB 液體(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適當體(ti)積(100 µl)的(de)復蘇細胞(bao),涂布在相應(ying)(ying)抗性的(de) LB 平(ping)板上(shang),正(zheng)置(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干燥后), 倒置(zhi)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出(chu)現菌落(luo)。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌落(luo)至相應(ying)(ying)抗性 LB 液體(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震(zhen)蕩(dang)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試(shi)驗需要提取(qu)質粒(li)。
生長條件
LB +氨芐(xia)青霉素,30℃(克隆菌株DH5a,9028bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
1
應用領域
科研
共享方(fang)式
公益性(xing)共享
