商品描述:
商品屬性
商品描述:
商品屬性
商品屬性:
產品名稱
pRL-TK
英文名稱
pRL-TK
規格
質粒(li)干粉
貨號
BJ-J1326
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收到質粒(li)(li)干(gan)粉后(hou),請(qing)加(jia)入 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管底,溶解質粒(li)(li),室溫靜(jing)置(zhi) 1min; 2.混合(he)(吸(xi)附質粒(li)(li)): 200μl 感(gan)受態(tai)細胞 + 質粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)養(yang): 毎管加(jia) 800µl LB 液(ye)體培(pei)(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang): 將適當體積(ji)(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂布在相應(ying)抗(kang)性(xing)的 LB 平(ping)板上,正置(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面(mian)務必(bi)干(gan)燥后(hou)), 倒置(zhi)培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提(ti)取(qu): 挑(tiao)取(qu)單克隆菌(jun)落至(zhi)相應(ying)抗(kang)性(xing) LB 液(ye)體培(pei)(pei)養(yang)基(ji)中,震蕩(dang)培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗需要提(ti)取(qu)質粒(li)(li)。
生長(chang)條件
LB +氨芐(xia)青霉素,37℃(克(ke)隆(long)菌株DH5a,4045bp)
存儲條件
2-8℃
安(an)全等級
0
應(ying)用領域
科研
共(gong)享方(fang)式
公益性共享(xiang)
