商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pRL-TK
英文名稱
pRL-TK
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1326
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法(fa)
1.溶(rong)(rong)解: 收到質(zhi)粒干粉后,請加(jia)入 20μl 無菌水至管底,溶(rong)(rong)解質(zhi)粒,室溫(wen)靜置(zhi)(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(he)(吸附質(zhi)粒): 200μl 感受(shou)態細(xi)胞 + 質(zhi)粒 DNA 5~10µl 混勻,冰上放置(zhi)(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi)(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復(fu)(fu)培(pei)(pei)(pei)養: 毎管加(jia) 800µl LB 液體培(pei)(pei)(pei)養基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養: 將適(shi)當(dang)體積(100 µl)的復(fu)(fu)蘇細(xi)胞,涂布(bu)在相(xiang)應抗性的 LB 平(ping)板(ban)上,正置(zhi)(zhi)(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務必(bi)干燥后), 倒置(zhi)(zhi)(zhi)培(pei)(pei)(pei)養 12-16h,出現菌落(luo)。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單克隆菌落(luo)至相(xiang)應抗性 LB 液體培(pei)(pei)(pei)養基中,震蕩培(pei)(pei)(pei)養 12-16h,根據試驗需要提(ti)取(qu)質(zhi)粒。
生(sheng)長(chang)條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株DH5a,4045bp)
存儲條(tiao)件(jian)
2-8℃
安全(quan)等級(ji)
0
應用領域
科(ke)研
共享方式
公(gong)益性共享(xiang)
