商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pRSETA
英文名稱
pRSETA
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1332
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方(fang)法(fa)
1.溶解: 收(shou)到質(zhi)(zhi)粒(li)干粉后(hou),請加入 20μl 無菌水至(zhi)管底,溶解質(zhi)(zhi)粒(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)(zhi)粒(li)): 200μl 感(gan)受態細胞 + 質(zhi)(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放(fang)置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復培(pei)養(yang): 毎管加 800µl LB 液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培(pei)養(yang): 將適當體(ti)積(100 µl)的復蘇細胞,涂布在(zai)相應抗性的 LB 平板上,正置(zhi)(zhi)平皿(min) 30min(瓊(qiong)脂面務必干燥(zao)后(hou)), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)養(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取: 挑取單(dan)克隆菌落至(zhi)相應抗性 LB 液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)中,震蕩(dang)培(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗(yan)需要提取質(zhi)(zhi)粒(li)。
生(sheng)長條件
LB +氨(an)芐青霉素,37℃(克隆菌株DH5a)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
蛋(dan)白表達
共享方(fang)式(shi)
公(gong)益性共(gong)享
