商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pRSFDuet-1
英文名稱
pRSFDuet-1
規格
質粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1333
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解(jie): 收(shou)到(dao)質粒(li)(li)干粉(fen)后(hou),請加(jia)入(ru) 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管底,溶解(jie)質粒(li)(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附(fu)質粒(li)(li)): 200μl 感受態細(xi)胞 + 質粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮(suo)膜(mo)孔(kong): 冰(bing)浴 2min; 5.修(xiu)復(fu)培養: 毎管加(jia) 800µl LB 液體(ti)培養基(ji),37 ℃培養 1h 150 r/min; 6.篩選培養: 將適當體(ti)積(ji)(100 µl)的(de)(de)復(fu)蘇(su)細(xi)胞,涂布在相(xiang)應抗性的(de)(de) LB 平(ping)板上,正置(zhi)(zhi)平(ping)皿(min) 30min(瓊脂面務必干燥后(hou)), 倒(dao)置(zhi)(zhi)培養 12-16h,出(chu)現(xian)菌(jun)落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單(dan)克隆菌(jun)落至(zhi)相(xiang)應抗性 LB 液體(ti)培養基(ji)中(zhong),震蕩培養 12-16h,根(gen)據試驗(yan)需要(yao)提取(qu)質粒(li)(li)。
生長條(tiao)件
LB +卡那(nei)霉素,37℃(克隆菌株DH5a,3829bp)
存儲條件
2-8℃
安全(quan)等級
1
應用領(ling)域
大腸系列質粒;大腸其它質粒;大腸雙框質粒 蛋白表達
共(gong)享方(fang)式(shi)
公益性(xing)共享
