商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pRSFDuet-1
英文名稱
pRSFDuet-1
規格
質粒干(gan)粉(fen)
貨號
BJ-J1333
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收到質(zhi)粒(li)干(gan)粉(fen)后,請(qing)加入(ru) 20μl 無菌水至管(guan)底,溶解質(zhi)粒(li),室溫靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細胞(bao)(bao) + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻(yun),冰(bing)上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔(kong): 冰(bing)浴 2min; 5.修復培(pei)(pei)養(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液(ye)體培(pei)(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang): 將適當體積(100 µl)的復蘇細胞(bao)(bao),涂(tu)布在(zai)相應(ying)抗性的 LB 平板上,正置(zhi)平皿(min) 30min(瓊脂面務必(bi)干(gan)燥后), 倒置(zhi)培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出現(xian)菌落。 7.提取: 挑(tiao)取單(dan)克(ke)隆菌落至相應(ying)抗性 LB 液(ye)體培(pei)(pei)養(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗需要提取質(zhi)粒(li)。
生長(chang)條(tiao)件
LB +卡那霉素(su),37℃(克隆菌株(zhu)DH5a,3829bp)
存儲條件
2-8℃
安(an)全(quan)等級
1
應用(yong)領(ling)域(yu)
大腸系列質粒;大腸其它質粒;大腸雙框質粒 蛋白表達
共享方(fang)式
公(gong)益性共享
