商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pRSV-Rev
英文名稱
pRSV-Rev
規格
質(zhi)粒(li)干粉
貨號
BJ-J1334
商品詳情
培養(yang)基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶解(jie): 收到質(zhi)粒干粉(fen)后(hou),請加入 20μl 無菌(jun)(jun)水至(zhi)管(guan)底,溶解(jie)質(zhi)粒,室(shi)溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(he)(吸附質(zhi)粒): 200μl 感受態細胞(bao) + 質(zhi)粒 DNA 5~10μl 混勻,冰上(shang)放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜(mo)孔: 冰浴 2min; 5.修(xiu)復(fu)培(pei)養: 毎管(guan)加 800μl LB 液體(ti)培(pei)養基(ji),37 ℃培(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養: 將適當體(ti)積(100 μl)的復(fu)蘇(su)細胞(bao),涂布在相(xiang)應抗性的 LB 平板上(shang),正置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干燥后(hou)), 倒(dao)置(zhi)(zhi)培(pei)養 12-16h,出現菌(jun)(jun)落(luo)。 7.提取: 挑取單克隆菌(jun)(jun)落(luo)至(zhi)相(xiang)應抗性 LB 液體(ti)培(pei)養基(ji)中,震(zhen)蕩(dang)培(pei)養 12-16h,根(gen)據試驗需要提取質(zhi)粒。
生長條件
LB +氨芐(xia)青霉素,37℃(克(ke)隆菌株Stbl3,4180bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應(ying)用領域
科研
共(gong)享方式
公(gong)益性共享
