商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pRSV-Rev
英文名稱
pRSV-Rev
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1334
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法(fa)
1.溶解: 收(shou)到質粒(li)干粉后,請加(jia)入 20μl 無菌(jun)水至管(guan)底,溶解質粒(li),室溫(wen)靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附(fu)質粒(li)): 200μl 感受態(tai)細(xi)胞 + 質粒(li) DNA 5~10μl 混勻,冰上放置(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導(dao)入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔(kong): 冰浴 2min; 5.修復培(pei)(pei)養: 毎管(guan)加(jia) 800μl LB 液(ye)體培(pei)(pei)養基,37 ℃培(pei)(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選(xuan)培(pei)(pei)養: 將(jiang)適(shi)當體積(100 μl)的(de)復蘇(su)細(xi)胞,涂布在相應抗(kang)性的(de) LB 平板上,正置(zhi)平皿 30min(瓊脂面(mian)務必干燥(zao)后), 倒置(zhi)培(pei)(pei)養 12-16h,出現(xian)菌(jun)落(luo)。 7.提(ti)取: 挑取單克隆菌(jun)落(luo)至相應抗(kang)性 LB 液(ye)體培(pei)(pei)養基中,震(zhen)蕩培(pei)(pei)養 12-16h,根(gen)據試驗需要(yao)提(ti)取質粒(li)。
生長條件
LB +氨芐(xia)青(qing)霉素(su),37℃(克隆菌株Stbl3,4180bp)
存儲(chu)條件
2-8℃
安全等級
0
應用領(ling)域
科研
共享(xiang)方式
公益性(xing)共享
