商品描述:
商品屬性
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產品名稱
PSH65
英文名稱
PSH65
規格
質粒干粉(fen)
貨號
BJ-J1336
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶(rong)解: 收(shou)到質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)干粉后(hou),請加(jia)入 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管(guan)(guan)底(di),溶(rong)解質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li),室(shi)溫靜(jing)置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(he)(吸附質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)): 200μl 感受態細(xi)胞 + 質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li) DNA 5~10μl 混勻,冰(bing)上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導入: 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)養(yang): 毎管(guan)(guan)加(jia) 800μl LB 液(ye)(ye)體培(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang): 將適當體積(100 μl)的(de)復(fu)蘇細(xi)胞,涂布在相(xiang)應(ying)抗性的(de) LB 平(ping)板上,正置(zhi)(zhi)平(ping)皿(min) 30min(瓊脂(zhi)面務必干燥后(hou)), 倒(dao)置(zhi)(zhi)培(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取(qu)(qu)(qu): 挑取(qu)(qu)(qu)單克隆菌(jun)落至(zhi)相(xiang)應(ying)抗性 LB 液(ye)(ye)體培(pei)養(yang)基中,震蕩培(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗需(xu)要提取(qu)(qu)(qu)質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)。
生長條件
LB +氨芐青(qing)霉(mei)素,37℃(克(ke)隆菌株DH5α,8138bp)
存(cun)儲條(tiao)件
2-8℃
安(an)全等(deng)級
0
應(ying)用領域
科研
共享方式
公益性共享
