商品屬性：

產品名稱	pTrc99a
英文名稱	pTrc99a
規格	質粒(li)干(gan)粉
貨號	BJ-J1340

商品詳情

培養基(ji)	酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，pH：7.0(25℃)
傳代(dai)方法	1.溶解(jie)： 收(shou)到質(zhi)(zhi)粒干粉后，請加(jia)入(ru) 20μl 無(wu)菌(jun)水(shui)至管底，溶解(jie)質(zhi)(zhi)粒，室溫靜置(zhi)(zhi) 1min； 2.混合(he)（吸附質(zhi)(zhi)粒）： 200μl 感受態(tai)細胞 + 質(zhi)(zhi)粒 DNA 5~10µl 混勻(yun)，冰(bing)上(shang)放置(zhi)(zhi) 30min； 3.熱(re)激導入(ru)： 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s； 4.收(shou)縮膜孔： 冰(bing)浴 2min； 5.修復培(pei)(pei)養(yang)(yang)： 毎管加(jia) 800µl LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基，37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min； 6.篩(shai)選培(pei)(pei)養(yang)(yang)： 將適當體積（100 µl）的復蘇細胞，涂(tu)布在相應抗(kang)性的 LB 平板(ban)上(shang)，正置(zhi)(zhi)平皿(min) 30min（瓊脂(zhi)面務必干燥后）， 倒置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h，出現菌(jun)落。 7.提取： 挑取單克隆(long)菌(jun)落至相應抗(kang)性 LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基中(zhong)，震蕩(dang)培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h，根據試驗需要提取質(zhi)(zhi)粒。
生長條件	LB +氨芐青霉素，37℃（克隆菌株(zhu)DH5α，6849bp ,啟動子(zi)(zi):Trc 復制(zhi)子(zi)(zi):PBR322 終止子(zi)(zi):rrnB T2 ）
存儲條件	2-8℃
安全等級(ji)	1
應用(yong)領域	科研
共享(xiang)方式(shi)	公益性共享(xiang)