商品屬性：

產品名稱	pTrc99a
英文名稱	pTrc99a
規格	質(zhi)粒干粉(fen)
貨號	BJ-J1340

商品詳情

培(pei)養基	酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，pH：7.0(25℃)
傳代方法	1.溶解(jie)： 收(shou)到質(zhi)粒干(gan)粉后，請加(jia)入 20μl 無菌(jun)水至管底，溶解(jie)質(zhi)粒，室溫(wen)靜置(zhi) 1min； 2.混(hun)合（吸附質(zhi)粒）： 200μl 感受態細(xi)胞(bao) + 質(zhi)粒 DNA 5~10µl 混(hun)勻(yun)，冰上(shang)放置(zhi) 30min； 3.熱激(ji)導入： 42℃靜置(zhi) 90s； 4.收(shou)縮膜(mo)孔： 冰浴(yu) 2min； 5.修復培養(yang)(yang)(yang)： 毎管加(jia) 800µl LB 液體培養(yang)(yang)(yang)基，37 ℃培養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min； 6.篩選培養(yang)(yang)(yang)： 將適當體積（100 µl）的(de)(de)復蘇(su)細(xi)胞(bao)，涂布在相應抗(kang)性(xing)的(de)(de) LB 平板(ban)上(shang)，正(zheng)置(zhi)平皿 30min（瓊脂面務(wu)必干(gan)燥后）， 倒置(zhi)培養(yang)(yang)(yang) 12-16h，出現菌(jun)落。 7.提取： 挑取單克隆菌(jun)落至相應抗(kang)性(xing) LB 液體培養(yang)(yang)(yang)基中，震(zhen)蕩培養(yang)(yang)(yang) 12-16h，根據試驗(yan)需要(yao)提取質(zhi)粒。
生長(chang)條件	LB +氨芐(xia)青霉素，37℃（克(ke)隆(long)菌(jun)株DH5α，6849bp ,啟動(dong)子:Trc 復制子:PBR322 終止子:rrnB T2 ）
存儲條件	2-8℃
安(an)全(quan)等級	1
應用領域	科研
共享方式	公益性共(gong)享