商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pTRE3G
英文名稱
pTRE3G
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1341
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方(fang)法(fa)
1.溶解: 收到質(zhi)粒(li)(li)干粉后,請加入 20μl 無(wu)菌(jun)水至管(guan)底,溶解質(zhi)粒(li)(li),室溫靜(jing)置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態(tai)細胞 + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導(dao)入: 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮(suo)膜孔: 冰浴 2min; 5.修(xiu)復(fu)培(pei)養(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體培(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang): 將適當體積(ji)(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂布在相應抗(kang)(kang)性(xing)的 LB 平板上,正置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干燥(zao)后), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落(luo)(luo)。 7.提(ti)取(qu)(qu): 挑取(qu)(qu)單(dan)克隆菌(jun)落(luo)(luo)至相應抗(kang)(kang)性(xing) LB 液體培(pei)養(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗(yan)需要提(ti)取(qu)(qu)質(zhi)粒(li)(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉素(su),37℃(克隆菌株DH5α,3431bp ,啟動子:TRE3G 復制子:pUC )
存(cun)儲條件(jian)
2-8℃
安全等級
0
應用領(ling)域
宿主:哺乳動物 用途:蛋白表達
共享方(fang)式
公(gong)益(yi)性共(gong)享
