商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pTRE3G
英文名稱
pTRE3G
規格
質粒(li)干粉(fen)
貨號
BJ-J1341
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方(fang)法
1.溶(rong)(rong)解: 收到(dao)質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)干粉后,請加(jia)入 20μl 無菌(jun)水至管底(di),溶(rong)(rong)解質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸(xi)附質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)): 200μl 感(gan)受(shou)態細(xi)胞 + 質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱(re)激導入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔(kong): 冰浴 2min; 5.修復培(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管加(jia) 800µl LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適當體積(ji)(100 µl)的(de)復蘇(su)細(xi)胞,涂(tu)布在(zai)相應(ying)抗(kang)性的(de) LB 平板(ban)上,正置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊(qiong)脂(zhi)面務必干燥(zao)后), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)落至相應(ying)抗(kang)性 LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要提取(qu)質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,3431bp ,啟動(dong)子(zi)(zi):TRE3G 復制子(zi)(zi):pUC )
存(cun)儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用領(ling)域
宿主:哺乳動物 用途:蛋白表達
共享(xiang)方式
公益性共享
