商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pUCGm
英文名稱
pUCGm
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1347
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收到(dao)質(zhi)粒(li)干粉后,請加入 20μl 無菌水至(zhi)管(guan)底,溶解質(zhi)粒(li),室(shi)溫(wen)靜(jing)置(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附(fu)質(zhi)粒(li)): 200μl 感受(shou)態細(xi)胞 + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰(bing)上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導入: 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜(mo)孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修(xiu)復培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體(ti)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 將(jiang)適當體(ti)積(100 µl)的(de)復蘇細(xi)胞,涂布在(zai)相應抗(kang)性(xing)的(de) LB 平(ping)板上,正置(zhi)(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干燥后), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌落至(zhi)相應抗(kang)性(xing) LB 液體(ti)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震(zhen)蕩培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根(gen)據試驗需(xu)要提取(qu)質(zhi)粒(li)。
生長條件(jian)
LB +氨芐(xia)青霉素(su),37℃(克隆菌株DH5α,6481bp,復制(zhi)子:pUC )
存儲條件
2-8℃
安全等級
1
應(ying)用領域(yu)
科研
共享方式
公(gong)益性共享(xiang)
