商品描述:
商品屬性
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產品名稱
PUG6
英文名稱
PUG6
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1350
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶(rong)解(jie): 收到質(zhi)(zhi)粒(li)(li)干粉后(hou),請加入 20μl 無菌水至管(guan)底,溶(rong)解(jie)質(zhi)(zhi)粒(li)(li),室溫(wen)靜(jing)置 1min; 2.混(hun)合(吸(xi)附質(zhi)(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受(shou)態(tai)細胞 + 質(zhi)(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上放置 30min; 3.熱激(ji)導入: 42℃靜(jing)置 90s; 4.收縮(suo)膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選(xuan)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang): 將適當體積(ji)(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂布在(zai)相應(ying)(ying)抗性的 LB 平板上,正(zheng)置平皿 30min(瓊(qiong)脂(zhi)面務必干燥后(hou)), 倒置培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單(dan)克隆(long)菌落至相應(ying)(ying)抗性 LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要提取(qu)質(zhi)(zhi)粒(li)(li)。
生長(chang)條件
LB +氨(an)芐青霉素,37℃(克隆菌株(zhu)DH5a)
存儲條件
2-8℃
安(an)全等級
1
應用(yong)領域
科研
共享(xiang)方(fang)式
公益性共享(xiang)
