商品描述:
商品屬性
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產品名稱
PUG6
英文名稱
PUG6
規格
質粒(li)干粉
貨號
BJ-J1350
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法(fa)
1.溶解: 收(shou)(shou)到質(zhi)粒(li)(li)干(gan)粉后,請加入 20μl 無菌(jun)水至管(guan)底(di),溶解質(zhi)粒(li)(li),室溫靜(jing)置(zhi)(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細胞(bao) + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放置(zhi)(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導(dao)入: 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)(shou)縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)養(yang): 毎(mei)管(guan)加 800µl LB 液體培(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培(pei)養(yang): 將適當體積(100 µl)的復(fu)蘇(su)細胞(bao),涂布在(zai)相應抗性的 LB 平板(ban)上,正置(zhi)(zhi)(zhi)平皿(min) 30min(瓊(qiong)脂(zhi)面務必干(gan)燥后), 倒置(zhi)(zhi)(zhi)培(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)落至相應抗性 LB 液體培(pei)養(yang)基中,震蕩培(pei)養(yang) 12-16h,根據(ju)試驗需要提取(qu)質(zhi)粒(li)(li)。
生長(chang)條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆(long)菌株DH5a)
存儲條件
2-8℃
安全等級
1
應用領域(yu)
科研
共享方式
公益性共享
